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WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)基本過(guò)程1、獲取細(xì)胞或組織裂解物1）根據(jù)檢測(cè)蛋白的位置選擇合適的裂解buffer；2）選擇合適的蛋白酶抑制劑，避免蛋白降解，從而保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。2、蛋白定量3、電泳分離蛋白質(zhì)4、轉(zhuǎn)膜：根據(jù)不同的檢測(cè)目的和待測(cè)蛋白的特性,選擇合適的膜類(lèi)型。5、封閉：去掉膜上多余的非特異性結(jié)合位點(diǎn)，降低背景。6、一抗孵育一抗的選擇成功與否，是整個(gè)WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)成功的關(guān)鍵，選擇一抗有以下幾個(gè)注意點(diǎn)：1）選擇適合檢測(cè)標(biāo)本種屬的一抗；2）選擇適用于WB實(shí)驗(yàn)方法的一抗；3）選擇單克隆抗體或者...

進(jìn)行WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)時(shí)設(shè)置的對(duì)照成功進(jìn)行WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)，則設(shè)置合適正確的對(duì)照是*的，只要正確設(shè)置了這些對(duì)照，即可快速和準(zhǔn)確的找到WB的問(wèn)題所在，并保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和特異性！一般需要設(shè)置的對(duì)照如下：陽(yáng)性對(duì)照：明確表達(dá)檢測(cè)蛋白的組織或細(xì)胞，用于檢測(cè)抗體的工作效率；陰性對(duì)照：明確不表達(dá)檢測(cè)蛋白組織或細(xì)胞，用于檢測(cè)抗體的特異性；二抗對(duì)照：不加一抗，用于檢測(cè)二抗的特異性；內(nèi)參對(duì)照：檢測(cè)標(biāo)本的質(zhì)量和二抗系統(tǒng)；空白對(duì)照：不加一抗和二抗；用于檢測(cè)膜的性質(zhì)和封閉的效果。

上海信帆生物：《細(xì)胞》雜志日前刊登了武漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院教授宋保亮團(tuán)隊(duì)關(guān)于膽固醇的研究成果。該團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞內(nèi)膽固醇運(yùn)輸?shù)男峦緩?，具有重要的基礎(chǔ)和研究應(yīng)用價(jià)值。膽固醇是細(xì)胞內(nèi)含量非常豐富的一類(lèi)脂質(zhì)分子，它的分布極不均勻且高度動(dòng)態(tài)運(yùn)輸，對(duì)維持細(xì)胞的正常生命活動(dòng)至關(guān)重要。針對(duì)這一問(wèn)題，宋保亮團(tuán)隊(duì)通過(guò)巧妙設(shè)計(jì)、全基因組篩選，zui終鑒定出300多個(gè)與膽固醇運(yùn)輸相關(guān)的基因，進(jìn)而發(fā)現(xiàn)溶酶體通過(guò)和過(guò)氧化物酶體相互接觸，將膽固醇轉(zhuǎn)移給后者。他們鑒定出介導(dǎo)溶酶體與過(guò)氧化物酶體接觸的分子分別是...

樂(lè)普醫(yī)療：布局移動(dòng)醫(yī)療，發(fā)布兩款醫(yī)療APP十二屆全國(guó)人大三次會(huì)議上，李克強(qiáng)總理在政府工作報(bào)告中提出“互聯(lián)網(wǎng)+”行動(dòng)計(jì)劃，再度燃起了醫(yī)藥企業(yè)布局移動(dòng)醫(yī)療熱情。3月20日，樂(lè)普醫(yī)療在京發(fā)布兩款醫(yī)療APP——“同心管家”和“心衰管理”。移動(dòng)醫(yī)療的誕生為患者的疾病跟蹤、診斷和就醫(yī)帶來(lái)了極大的方便，一直是醫(yī)療企業(yè)共同關(guān)注的焦點(diǎn)。十二屆全國(guó)人大三次會(huì)議上，李克強(qiáng)總理在政府工作報(bào)告中提出“互聯(lián)網(wǎng)+”行動(dòng)計(jì)劃，再度燃起了醫(yī)藥企業(yè)布局移動(dòng)醫(yī)療熱情。樂(lè)普醫(yī)療在京發(fā)布兩款醫(yī)療APP3月20日，樂(lè)普...

每個(gè)標(biāo)本量收集體積＝50ul×檢測(cè)種類(lèi)，如要做復(fù)孔，標(biāo)本量收集體積＝50ul×檢測(cè)種類(lèi)×2。對(duì)于作某一個(gè)具體指標(biāo)來(lái)說(shuō)，先用一系列稀釋度作一批標(biāo)本測(cè)定，得出對(duì)實(shí)驗(yàn)有意義的一個(gè)稀釋度（即測(cè)定劑量反應(yīng)曲線），然后用一個(gè)zui適稀釋度測(cè)定即可。收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集?biāo)本，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí)，-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保...

白楊樹(shù)之死同干旱大氣有關(guān)多年來(lái)，理解氣候變化如何影響森林的微妙之處一直困擾著科學(xué)家。據(jù)美國(guó)《太平洋標(biāo)準(zhǔn)》雜志報(bào)道，如今，一項(xiàng)關(guān)于哪里的白楊樹(shù)會(huì)在什么時(shí)候因干旱和氣溫升高而死亡的研究正在幫助填補(bǔ)這個(gè)知識(shí)缺口。在一項(xiàng)本周發(fā)表于《自然—地球科學(xué)》上的研究中，科學(xué)家創(chuàng)建了一個(gè)展示如果不采取措施減少溫室氣體排放，干旱將導(dǎo)致美國(guó)山楊到2050年普遍死亡的模型。研究人員將該模型基于對(duì)樹(shù)干中水流量的測(cè)定。他們發(fā)現(xiàn)，對(duì)于白楊樹(shù)來(lái)說(shuō)，更加致命的并不是降水的缺乏，而是大氣增加的對(duì)水的需求，因?yàn)楦?..

多年來(lái)，癌癥治療的基本方法一直是手術(shù)、化療和放射治療。而現(xiàn)在，盡管免疫療法的研究始于多年前且進(jìn)展斷斷續(xù)續(xù)，但對(duì)免疫療法的興趣正在增長(zhǎng)，免疫療法是指利用患者免疫系統(tǒng)的力量來(lái)對(duì)抗疾病，一些醫(yī)學(xué)研究團(tuán)體稱(chēng)其為癌癥治療的“第五支柱”。多年來(lái)，癌癥治療的基本方法一直是手術(shù)、化療和放射治療。在過(guò)去十年中，靶向療法也成為多種癌癥的標(biāo)準(zhǔn)療法，如伊馬替尼（格列衛(wèi)）和曲妥珠單抗（赫賽?。?，這些是通過(guò)攻擊癌細(xì)胞上的特定分子變化來(lái)追蹤癌細(xì)胞的藥物。而現(xiàn)在，盡管免疫療法的研究始于多年前且進(jìn)展斷斷續(xù)續(xù)，...

上海信帆生物：“原子雞籠”讓基因測(cè)序更快更準(zhǔn)更便宜石墨烯是一種由六角形蜂巢結(jié)構(gòu)周期性緊密堆積的碳原子構(gòu)成的二維碳材料，從外形上看就如同制造雞籠的鐵絲網(wǎng)一般，被形象地稱(chēng)為“原子雞籠”。澳大利亞墨爾本大學(xué)的科學(xué)家日前正是借助這種材料，開(kāi)發(fā)出了一種新的DNA測(cè)序技術(shù)，有望為這項(xiàng)廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域的技術(shù)帶來(lái)一次新的變革。相關(guān)論文發(fā)表在《自然·通訊》雜志上。領(lǐng)導(dǎo)此項(xiàng)研究的澳大利亞墨爾本大學(xué)的吉日·塞維卡和尼古拉·杜斯科特表示，他們發(fā)現(xiàn)石墨烯這種像雞籠一樣的材料，能夠準(zhǔn)確地檢測(cè)出組成DN...

3月23日，中科院大連化物所趙宗保研究員和鄒漢法研究員提出了“同位素標(biāo)記SAM甲基化”研究新策略，深入解析了模式生物釀酒酵母的蛋白質(zhì)甲基化組，對(duì)蛋白質(zhì)甲基化實(shí)現(xiàn)全覆蓋，研究成果zui近發(fā)表在JournalofProteomics(2015,114,226)上。蛋白質(zhì)甲基化是一種非常重要的翻譯后修飾現(xiàn)象，其甲基供體為S-腺苷甲硫氨酸（SAM）。由于甲基化可發(fā)生在氨基酸殘基的N-,O-和S-中心，并且N-中心甲基化還存在不同狀態(tài)，同時(shí)甲基化對(duì)分離行為影響非常細(xì)微，限制了對(duì)蛋白質(zhì)甲...

中國(guó)科學(xué)院上海微系統(tǒng)與信息技術(shù)研究所石墨烯研究再獲重要突破。信息功能材料國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，超導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室石墨烯課題組的唐述杰等人，在上通過(guò)引入氣態(tài)催化劑的方法成功實(shí)現(xiàn)石墨烯單晶在六角氮化硼表面的高取向快速生長(zhǎng)，研究論文Silane-CatalyzedFastGrowthofLargeSingle-CrystallineGrapheneonHexagonalBoronNitride于3月11日在NatureCommunications上發(fā)表（6:6499doi:10.1038/nco...